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          您的位置:網站首頁 聚丙烯酰胺信息 廠家動態 聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳法的三個效應
           
          雙擊自動滾屏 網址:www.pharmacyflex.com   編輯:admin    日期:2013/4/13 16:24:34   瀏覽數:
          1、樣品濃縮效應
          1)凝膠孔徑不連續性:在3層凝膠中樣品膠及濃縮膠為大孔徑膠,在2層凝膠中樣品/濃縮膠為大孔徑膠,分離膠為小孔徑膠;在電場作用下,被分離物在大孔徑中移動遇到阻力小,移動速度快,當進入小孔徑膠時,被分離物移動受到阻力大,移動速度變慢,因而在兩種膠的交界處,由于凝膠孔徑的不連續性使樣品遷移受阻而壓縮成很窄的區帶。
          2)緩沖體系離子成分及pH值的不連續性:在濃縮膠中,由于被分離物的pI介與前導離子與尾隨離子的pK之間,共同向正極移動,并被濃縮成極窄的區帶里。
          3)電位梯度的不連續性:在不連續系統中,電位梯度的差異是自動形成的。電泳開始后,由于前導離子的遷移率最大,就會很快超過被分離物,因此在快離子后面,形成一個離子濃度低的區域,這時就有了較高的電位梯度。這種高電位梯度使后面被分離物和尾隨離子在前導離子后面加快移動。當前導離子、被分離物和尾隨離子的移動速度相同時,建立一種穩定狀態,這時在前導離子和尾隨離子之間形成一個穩定而又不斷向正極移動的界面,這就是樣品被濃縮的中間層。
          2、電荷效應
          在濃縮膠中,被分離物的各組分被濃縮,特別是在濃縮膠與分離膠的分界處被高度濃縮,形成一個狹窄的高濃度區,但進入分離膠中,被分離物中各組分所帶電荷不同,而有不同的遷移率,表面電荷多,遷移快,反之則慢。因此被分離物按照電荷多少、分子量及形狀,以一定順序排列。
          3、分子篩效應
          分子量或分子大小和形狀不同的被分離物通過一定孔徑分離膠時,受阻塞的程度不同而表現出不同的遷移率,這就是分子篩效應。
          經過濃縮效應后,前導離子、被分離物和尾隨離子均進入分離膠中,這時膠的pH值不同,使得前導離子與尾隨離子的遷移率相同,不再形成高電壓,所有物質在同一、均一電壓梯度下遷移。這時影響分子量大小和形狀與其遷移率密切相關:分子量小并且為球型的移動快。

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